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胎牛血清的凍存和復蘇的過程詳解

更新時間:2024-05-22點擊次數:433
  胎牛血清是一種常用的細胞培養添加劑,它提供細胞生長必需的營養物質、生長因子和附著因子。為了確保FBS的長期保存和使用效果,正確的凍存和復蘇操作至關重要。以下是關于胎牛血清凍存和復蘇的詳細描述:
  1. 胎牛血清的接收與檢查:
  - 在接收新的FBS時,應檢查外包裝是否完好無損,以確保無菌條件。
  - 確認血清的生產日期、有效期和批次號,以便追溯和質量控制。
  2. 凍存前的準備工作:
  - 在凍存前,FBS應存放在2-8°C的冰箱中,避免反復凍融,因為這會影響血清中的蛋白質和其他成分的穩定性。
  - 準備適量的無菌凍存管或瓶子,并確保它們的密封性能良好。
  3. 分裝與標記:
  - 根據使用需求,將FBS分裝到準備好的凍存管中,避免一次性解凍大量血清,以減少反復凍融對血清質量的影響。
  - 在每個凍存管上清晰標記血清的批次號、分裝日期和有效期,以便使用時能夠追溯。
  4. 凍存方法:
  - 將分裝好的FBS放入-20°C冰箱中預凍數小時,然后轉移到-80°C超低溫冰箱或液氮罐中長期保存。
  - 確保凍存過程中溫度的逐漸降低,避免快速冷凍導致的血清成分變性。
  5. 復蘇(解凍)步驟:
  - 在使用FBS前,將其從凍存環境中取出,并在2-8°C的冰箱中緩慢解凍,通常需要過夜。
  - 避免在室溫下長時間放置,以防細菌污染和血清成分的變化。
  - 也可以將凍存管置于37°C水浴中快速解凍,但需注意防止水浴的污染。
  6 使用與再凍存
  - 解凍后的FBS應在解凍當天使用,以保證其生物活性和營養成分的完整性。
  - 如果一次未使用完,可以將剩余的FBS重新凍存,但應注意避免反復凍融,因為這會降低血清的質量。
  7. 注意事項:
  - 在整個凍存和復蘇過程中,應嚴格遵守無菌操作規程,以防止微生物污染。
  - 使用無菌的移液工具和容器,避免交叉污染。
  - 定期檢查凍存設備的溫度記錄,確保凍存環境穩定。
  8質量控制:
  - 在使用新批次的FBS之前,建議進行小規模的細胞培養試驗,以評估血清的質量和適用性。
  - 記錄每次凍存和復蘇的詳細信息,包括日期、時間和使用情況,以便在出現問題時進行追溯。